El sistema de edición CRISPR requiere una enzima que reconozca un sitio específico llamado PAM y que actúe como tijera para cortar la secuencia de ADN de interés.
Cas9 es la enzima utilizada con mayor frecuencia para este sistema, ya que reconoce una secuencia PAM rica en guanina y corta el ADN directamente, lo que permite que el mecanismo de reparación natural de la célula introduzca una modificación en la secuencia del ADN objetivo.
Se ha descubierto y comprobado que Cas12a o Cpf1 desempeñan mejor la función que Cas9, ya que reconoce una PAM rica en timina, es capaz de cortar y producir extremos pegajosos, y es aplicable para la orientación de múltiples genes.
Varios investigadores chinos han aplicado el sistema Cpf1 en el arroz. En su estudio, aplicaron el sistema CRISPR-Cpf1 para identificar los genes OsPDS y OsGS3 en el arroz. Los hallazgos muestran aproximadamente el 78 y el 92 por ciento de eficiencia de mutación del sistema en los dos genes, respectivamente. Los investigadores modificaron aún más el sistema e incluyeron un promotor diferente para mejorarlo. Los resultados mostraron una mayor eficiencia de mutación del sistema en el arroz.
[FUENTE: Plant Biotechnology]